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产品线涵盖分子生物、细胞培养、样品处理、微生物学、样品冻存、免疫检测、核酸提取、蛋白纯化、食品检测等方面,为客户提供品质产品及专业技术服务。

质粒DNA小量抽提试剂盒
    发布时间: 2021-08-07 09:14    

品牌:BeaverBeads™


货号:MN-P96-1G / MN-P96-4G / MN-P96-24G


规格:96 rxns


材质:磁珠


分类:核酸提取


定制:是


包装:1G / 4G / 24G


本试剂盒采用改进的 SDS 碱裂解法,结合 DNA 磁珠选择性吸附 DNA 的方法,达到快速纯化质粒 DNA的目的。适合从 1-4mL 细菌培养物中提取多至 20μg 高纯度的质粒 DNA,用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。


产品信息


Rnase A: 50 mg/mL ,室温保存。
Buffer S1:细菌悬浮液。加入 Rnase A 后,4℃保存。
Buffer S2:细菌裂解液,室温密闭储存。若出现沉淀,应于 37℃温浴溶解并冷却至室温后再使用。
Buffer N3:中和液,室温密闭储存。 Beads: 磁珠溶液,4℃储存。
Elutent:2.5 mM Tris-HCl, pH 8.5,室温密封储存。

操作流程

使用前准备
        70% 乙醇
        第一次使用前,RNase A 全部加入 Buffer S1 中,4℃储存
        准备无核酸和核酸酶污染的 Tip 头等耗材
        异丙醇
        磁性分离器:可选用海狸磁性分离器,Cat.60201

操作流程

1.第一次使用前,RNase A全部加入Buffer S1中,4℃储存。

2.取1-4mL在LB培养基中培养过夜的菌液(若使用丰富的培养基,菌液体积应减半或更少),12000g离 心1min,弃上清。

3.用100μL已加入RNase A的Buffer S1悬浮细菌沉淀,悬浮需均匀,不应留有小的菌块。

4.加入100 μLBuffer S2,温和并充分地上下翻转混合6-8次,12000g离心10min。

5.吸取125μL步骤4中的离心上清于一新的1.5mL离心管中。

6.加入40 μL beads和60 μL的异丙醇,用枪头吹打3-5次。

表1:转移不同上清液量和对应beads和异丙醇体积用量

      a)Beads易沉淀,使用前应摇匀,使Beads充分混匀
      b)根据上清体积调整异丙醇的比例

7.室温放置5min,放置过程中,用枪头吹打混合2-3次。

8.将反应管置于磁力架上静置30s,直至磁珠完全吸附至管壁,上清清澈后,吸弃液体。
a)注意勿将磁珠吸出
b)弃液体后,勿将反应管从磁力架上取出

9.加入200μL70%乙醇,在室温下放置30s,吸弃液体。重复操作1次。
a)注意勿将磁珠吸出
b)注意在磁力架上操作,勿从磁力架上取出反应管
c)请务必吸尽反应管内残留的液体

10.让磁珠在室温下干燥3-5min.
a)注意在磁力架上操作,勿从磁力架上取出反应管
b)在室温下翻转取出残留的乙醇
c)勿使磁珠过分干燥,否则将影响DNA得率

11.移去磁力架,加入60-100μL Eluent或去离子水,用移液器吸头轻轻吹打管壁磁珠,直至分布均匀,静置2min。

12.将反应管置于磁力架上,静置直至磁珠全部吸附至管壁,吸取上清至一新的离心管中,即得高纯度的DNA。


产品名称编号型号单位
质粒DNA小量抽提试剂盒MN-P96-1G96 rxns
质粒DNA小量抽提试剂盒MN-P96-4G4*96 rxns
质粒DNA小量抽提试剂盒MN-P96-24G24*96 rxns



实验案例