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酶标板简介
来源: | 作者:muchen | 发布时间: 2021-08-05 | 22 次浏览 | 分享到:


酶标板(ELISA PLATE)在酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。

作为载体的固相聚苯乙烯(Polystyrene)表面对抗原、抗体或抗原抗体复合物的吸附也起着重要作用。
抗原、抗体和其它生物分子通过多种机制吸附至载体表面,这包括通过疏水键、流水/离子键的被动吸附,通过引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合,以及通过表面改性后的亲水键结合

分类
类型主要根据酶标仪进行选择。又分可拆和不可拆的,对于不可拆的,就是一整块板上的板条都是连在一起的,那么可拆的就是板子上面的板条是分开的,分出来的板条又有12孔和8孔之分。一般用的较多的是可拆的酶标板,如果你之前买了一些这样的板子,那么完全可以只买些酶标板条就可以了。不同的厂家做出来的酶标板虽然整体看上去是差不多的,但是有些小的细节方面会做的不一样,比如结构等,这主要是因为要配合不同酶标仪使用,因此,当你在选择购买酶标板时还要考虑一下你的酶标仪是什么样子。不过一般都是适配的,只有个别的会有所不同。 因为酶标板的材质一般为聚苯乙烯(PS),而聚苯乙烯的化学稳定性较差,可以被多种有机溶剂(如:芳烃、卤代烃等)溶解,会被强酸强碱腐蚀,不抗油脂,在受到紫外光照射后易变色,所以在使用过程中一定要注意这些。

高结合力酶标板
酶标板经表面处理后蛋白结合能力大大増强,可达300-400ng 1gG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。使用该类酶标板可提高敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。

中结合力酶标板
酶标板经表面疏水键被动与白结合,适合作为分子量20D的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200-300 ng 1gG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的非特异性交又反应。该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液

氨基化酶标板
醇标板经表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由杀水键取代。该类晦标板适合作为小分子蛋白的固相载体。使用合适的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的能力,可用于固定溶于 Triton-100、 Tween20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效地封闭。由于亲水和共价的表面特性,使用的封闭液必须能够与非反应性氨基基团和所选择的交联剂中任何功能基团发生作用。

酶标板的蛋白质吸附性测定
可以使用已知浓度的某蛋白溶液,在ELISA用的空白聚苯乙烯板上进行包被。包被结束后测定孔内溶液的蛋白浓度,包被前孔内蛋白量减去包被后的蛋白量就是吸附在酶标板上的蛋白量。这样就可以知道酶标板的吸附性。


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