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酶标板的分类及选择
来源: | 作者:muchen | 发布时间: 2021-08-05 | 36 次浏览 | 分享到:


酶标板作为载体的固相聚苯乙烯表面对抗原、抗体或抗原抗体符合物的吸附起到很重要的作用。在常用于酶联免疫吸附试验中,参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。


酶标板的分类:
1、根据孔数,可分为96孔、48孔,其中96孔是现在最常用的,因为酶标板就是配合酶标仪用,现在的酶标仪做出来的最多的是96孔,所以客户在购买时也是要96孔板,厂家也为了适应市场基本上做出来的就是96孔的。

2、根据颜色又分为透明、黑色、白色。透明的是最常用的,用于最一般的酶联免疫实验。相对于透明的的板子,还有用于发光检测用的不透明的板子,一般有黑色和白色两种。黑色的酶标板自身会有光吸收,所以它的信号相对于白色的板子要低很多,因此一般用于检测较强的光,如荧光检测。而白色的酶标板就用于较弱的光检测,常用于一般的化学发光。另外黑色的酶标板还可以消弱非特异反应带来的问题。有些客户会问,用一般的酶标板可不可以进行发光检测,回答是不可以的,因为一般从化学发光反应中发射出的光是各向同性的,也就是说各个方向上同等发射出来的。如果用透明的板子,光不仅会从垂直方向发散,还从水平方向发散出来。很容易的就会通过各个孔之间的间隙和孔壁。这样的话,光较强时相邻孔之间的影响就会很大,因此不能用透明的酶标板来进行化学发光实验。

3、高结合力酶标板:酶标板经表面处理后蛋白结合能力大大增强,可达300~400ngIgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。使用该类酶标板可提高敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。

4、中结合力酶标板:酶标板经表面疏水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200~300ngIgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的特异性交叉反应。该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液。

5、氨基化酶标板:酶标板经表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由亲水键取代。该类酶标板适合作为小分子蛋白的固相载体。使用合适的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效地封闭。由于亲水和共价的表面特性,使用的封闭液必须能够与非反应性氨基基团和所选择的交联剂中任何功能基团发生作用。

酶标板的选择:

根据底部不同,酶标板可分为平底、U型底平底、V型底三类。平底:底部读数平板与细胞培养用,折光率较低,适合用于上酶标仪读数。U型底:折光率较高,方便加样、吸样、混匀等操作, 也适用于不需上机读数、直接通过目测颜色深浅,可用于凝集。V型底:精确吸取样品和储存样品。


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